喉癌细胞

　　摘要：细胞的种种功能活动受到复杂的信号转导通路的调控，精细调节的信号转导，是正常生命活动的前提，如果信号转导异常，即可导致病理过程。EGFR和P16基因在喉癌细胞信号转导中起重要作用，同时，在喉癌细胞中呈现EGFR高表达和P16基因的突变或纯合子的缺失。因此，针对二基因，我们从信号转导的角度进行信号转导干预治疗（interference therapy in signal transduction）的研究，希望为喉癌个体化基因治疗寻找一个新的突破口。 为了研究与EGFR、P16有关的喉癌细胞信号转导干预治疗的分子机理、喉癌细胞的细胞周期变化、细胞凋亡、一般形态结构及超微结构变化等，我们以重组腺病毒为载体，构建了EGFR反义的cDNA （AS）互补结合EGFR基因功能区，从而阻断EGFR的mRNA的合成及蛋白的表达，达到抑制喉癌细胞生长的作用，在此过程中，一起构建EGFR正义cDNA （S）,并研究其功能。同时，我们引入外源性的p16β基因，转移至喉癌细胞内，将肿瘤细胞阻滞在G1期，从而抑制肿瘤细胞的生长。与此同时，我们建立了人喉癌Hep-2细胞的裸鼠动物模型，将裸鼠随机分组后，分别进行重组腺病毒携带的p16β、AS、S、AS+P16基因、空载体和PBS对照的直接肿瘤注射治疗，观察治疗过程中肿瘤体积变化，目的基因的蛋白表达或已表达蛋白的抑制，用SPSS11.05软件进行统计学处理，我们得到的结果如下： 1.本研究成功构建了EGFR cDNA 1032bp片段的反义mRNA表达重组腺病毒；同时构建了相应1032 bp片段的正义mRNA表达重组腺病毒作为对照，并制备了高滴度的重组腺病毒颗粒。 2.本研究成功构建了p16β全长cDNA的重组腺病毒并制备了高滴度的重组腺病毒颗粒。 3.携带目的基因的重组腺病毒感染Hep-2培养细胞后目的基因高效转移到细胞并在细胞内表达（P16）或抑制细胞表达（EGFR）。 4.通过对携带目的基因的重组腺病毒感染Hep-2培养细胞的MTT实。

　　专业：耳鼻咽喉科学

　　学位：博士

　　院校：四川大学中文关键词

　　作者：鲜均明