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(1)后脑损伤组脑组织的水含量,细胞外液谷氨酸浓度明显高于对照组;(2)脑损伤组损伤区域的脑水肿和细胞外液谷氨酸呈自身扩播性;(3)拉莫三嗪治疗组脑组织含水量以及谷氨酸浓度明显低于脑损伤非治疗组。结论 拉莫三嗪通过抑制神经细胞释放谷氨酸而发挥对脑水肿的治疗作用。
结 果
所有资料采用POMS-2统计程序,进行完全随机设计的方差分析,并进行两两比较。
六、统计学处理
透析液中游离氨基酸的测定采用美国Waters公司推出的PICO—TAG氨基酸分析方法。此法采用柱前衍生法,反相分离的原理。
五、游离氨基酸测定
将大鼠头部固定在带有步进马达的立体定位仪上,从“球拍”型骨窗的手柄处(即脑损伤边缘2mm)缓慢插入透析针4mm深,同时缓慢注入人工脑脊液(2μl/min),并于伤后30、60、90和120分钟收集透析液,迅速低温贮存待检。
四、微透析技术取样
2.后脑损伤后不同区域脑组织含水量测定:按上述方法复制脑损伤模型,于伤后2小时,迅速断头取脑,然后用5mm的打孔器分别在脑损伤中心区、边缘区、对侧大脑相应部位取样,并按干湿重法计算脑组织含水量。
1.全脑组织含水量测定:各组大鼠实验后2小时迅速断头取脑,去除小脑,脑干,称重后置于平皿中,放入110℃烤箱中干燥24小时,然后再称重,按干湿重法计算脑组织含水量。
三、脑组织含水量测定
大鼠以3%水合氯醛(1mg/kg)腹腔注射麻醉,俯位固定头部。矢状切开头皮,显露右顶骨,于人字缝前2mm、中线右旁2mm处钻孔,扩大骨窗,直径约4mm,呈“球拍”型。将撞杆头端置于骨窗硬脑膜外,用自制自由落体撞击装置,20g砝码,从20cm高处坠落,冲击撞杆,造成右顶叶局限性脑挫裂伤,治疗组于伤前2小时和伤前即刻饲服拉莫三嗪(20mg/kg)(由英国葛兰素公司提供),对照组和损伤组不做任何处理。
二、急性后脑损伤模型
一、 脑损伤后脑组织细胞外液兴奋性氨基酸(EAA)异常增高,导致急性神经细胞肿胀和迟发性神经细胞损害已得到实验证实,并越来越引起人们重视[1]。我们通过大鼠损伤模型,应用微透析技术和氨基酸分析仪,直接对活体大鼠脑损伤后不同时相,不同区域脑组织水含量以及细胞外液的谷氨酸浓度进行测定,观察拉莫三嗪对脑组织水含量和细胞外液谷氨酸浓度的影响,并对其作用机制进行讨论。
后脑损伤