牛初乳免疫球蛋白A的纯化与原子力显微镜观测

    目的:纯化牛初乳免疫球蛋白A(Ig A)并在原子力显微镜(AFM)下进行观测。方法:应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段,从牛初乳中提取Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸(PL L)处理云母片基上的Ig A进行空气相的结构观测。结果:考马斯亮蓝染色鉴定纯化的蛋白含有重链、轻链和分泌片;正常生理条件下的Ig A以寡聚体结构为主,单体大约2 .6 nm×1 8.0 nm×2 0 .2 nm,与电镜结果基本吻合;Ig A在PL L 处理云母片基上的吸附呈现树枝状聚集,随孵育时间的延长,聚集现象更趋明显。结论:结合生化方法和AFM观测,可对Ig A等免疫球蛋白分子进行天然结构状态的微观探测,为研究其生理调控功能的结构基础提供有效的研究途径。