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SEB诱导的外周血淋巴细胞对K562细胞株杀伤作用的初步研究


www.cnkang.com  2007-3-21  中华康网

  我们研究了30例葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导的正常人外周血淋巴细胞的活化、细胞因子的产生及其淋巴细胞和细胞因子对红、白血病(K562)细胞株的杀伤作用,结果报告如下:

  取健康志愿献血员的外周血10ml(解放军总医院输血科提供),枸橼酸钠抗凝,常规无菌分离淋巴细胞,配成1×106/ml浓度,将淋巴细胞与SEB(终浓度为100ng/ml)置37℃ 5% CO2培养箱内孵育,分别在不同时间内检测淋巴细胞活化的数量、细胞因子产生的量及其对K562细胞株的杀伤作用。结果表明:淋巴细胞经SEB诱导后,2?d即明显增殖,6?d达到高峰。经流式细胞仪分析,增殖的细胞为CD4+和CD8+两种细胞;未经SEB活化的细胞即阴性对照组则基本无变化。在SEB刺激后2?d开始释放IL-2,4?d达高峰,然后缓慢下降;IFN-γ于2?d开始释放,6?d达到高峰;TNF-α的释放与IFN-γ基本同步。未经SEB刺激的细胞上清液各细胞因子均未检出。30例正常志愿献血员外周血淋巴细胞经SEB诱导后对K562细胞的杀伤率(%)分别为2?d:50.0±6.9;4?d:64.8±15.0;6?d:75.9±8.3,6?d时达高峰,与诱导前比均有显著性差异。SEB诱导的淋巴细胞上清液对K562细胞的杀伤率(%)分别为:2?d:4.7±2.4;4?d:21.1±7.0;6?d:25.6±10.0达到高峰。

  SEB是金黄色葡萄球菌肠毒素中的一种,它激活淋巴细胞的途径与有丝分裂原不同,它无需抗原提呈细胞(APC)的内处理加工,即可与MHCⅡ类分子非限制性结合。SEB与MHCⅡ类分子结合后,可激活受体上有Vβ3,12,14,15,17,20成份的T细胞,所以一种超抗原可激活大量包括CD4+和CD8+的T细胞。SEB活化的CD4+T细胞是一群辅助/杀伤细胞,具有直接杀伤表达MHCⅡ类分子肿瘤细胞的功能,SEB活化的CD8+细胞即CTL经TCR Vβ-超抗原-MHCⅡ类分子与MHCⅡ类分子阳性的肿瘤细胞相偶联,即可对后者发挥强烈的杀伤作用,上述的细胞毒作用即被称为金葡菌肠毒素依赖的细胞介导的细胞毒作用。

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