性激素六项检查最佳的时间，取决于男女性别以及检查的目的。分析如下：一、男性：通常测定性激素六项，了解包括性腺功能以及垂体功能。由于男性最重要的性激素是睾酮，而睾酮存在昼夜节律，而且脉冲分泌上下午有将近10%的差异，上午高下午低，因此要想了解男性性功能的情况，通常在上午8-9点之前空腹化验，避免食物影响性激素六项的结果。二、女性：往往测定的时间有更多要求，取决于化验的目的。1、如果女性测定性激素六项是想要了解卵泡、卵巢的功能，是否性激素之间匹配，建议在早卵泡期，也就是月经来潮2-4天抽血，这样结果才能更可靠；2、如果是想了解卵泡发育情况，是否快排卵，则需要测定基础体温，在基础体温升高第1天时，进行性激素六项化验；3、如果测定女性性激素六项，是想要了解黄体功能，同样需要借助基础体温测定，在基础体温升高7天时测定性激素六项，这样得出的孕酮结果才有助于判断黄体功能；4、如果测定的是男女泌乳素水平，正确抽泌乳素的方法应该是早上吃少量主食，提前半个小时到医院静静休息，在上午10-11点化验泌乳素结果最可靠。