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十二指肠溃疡的疼痛，多出现于中上腹，脐上方或脐上方偏右处。
由于十二指肠溃疡发生后可自行愈合，但每次愈合后又易复发，故常有上腹疼痛，长期反复发作的特点，整个病程平均6-7年，有的可长达10-20年，甚至更长。
上腹疼痛呈反复周期性发作，尤以十二指肠溃疡更为突出，中上腹疼痛发作，可持续几天 、几周或更长，继以较长时间的缓解，全年都可发作，但以春秋季发作的多见。
十二指肠溃疡疼痛与饮食之间有明显的相关性，在1天中，凌晨3点至早晨的一段时间，胃酸分泌最低，在此时间内很少发生疼痛。
十二指肠溃疡的疼痛，多在两餐之间发生，通常持续疼痛或者直至下餐缓解，进食或服制酸药物后缓解。
部分十二指肠溃疡患者，由于夜间的胃酸较高，尤其在睡前曾进食者，可在半夜发生疼痛，多呈钝痛，灼痛或饥饿样痛，一般较轻而能耐受。
如果患者持续性剧痛，提示溃疡穿孔，疼痛常因精神刺激、过度疲劳、饮食不慎、药物影响、气候变化等因素诱发或加重，可因休息、禁食、服制酸药以手按压疼痛部位、呕吐等减轻或缓解。
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