应用微波辐射技术进行病理组织特殊染色

    微波辐射技术在组织病理学上的应用已越来越广泛，它与常规方法比较，操作简便、省时快速，为越来越多的病理学工作者所青睐。病理组织特殊染色用常规方法一般需时较长，因此，我们应用微波辐射进行六胺银染色、抗酸杆菌染色、PAS染色、AB-PAS染色等，不仅节省大量时间，而且染色质量稳定可靠，取得了良好效果，现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 仪器 微波炉使用国产YW781医用微波仪，工作频率2450Hz，输出功率30～500W，分8个档次。

    1.2 标本 选用本院活检标本，中性福尔马林固定，常规脱水、透明、侵蜡、包埋，切片厚3μm。

    1.3 试剂 常规病理组织特殊染色所用试剂。

    1.4 步骤

    1.4.1 六胺银染色—改良Grocott-Joros染色法 切片常规脱蜡至水;0.5%高碘酸水溶液氧化10min;水洗、蒸馏水洗;将六胺银工作液加入微波炉（3档，输出功率170W）内预热1min后将切片浸入，将微波炉降至4档（输出功率120W）辐射2min;水洗;用HE浅染作对比染色;常规脱水、透明、封蜡。

    1.4.2 抗酸杆菌染色—Ziehl-Noelsen法 切片常规脱蜡至水;石硫酸复红液滴于切片上放入微波炉内5档照射2min;用滤纸吸干;1%盐酸酒精分化;水洗;苏木素染核;常规脱水、透明、封蜡。

    1.4.3 PAS染色法 切片常规脱蜡至水;放入0.5%过碘酸液5min;分别经蒸馏水和70%酒精冲洗;Schiff试剂滴于切片上，放入微波炉（6档）1min;流水冲洗;苏木素染核;常规脱水、透明、封蜡。

    1.4.4 AB-PAS染色法 切片脱蜡至水，阿尔新蓝溶液滴于切片上，放入微波炉内（6档）1min;水洗;放入0.5%高碘酸氧化5min;以下步骤同上。

    2 结果

    经过微波照射的染色切片，背景无气泡，反差大，颜色鲜艳，组织结构清晰，无脱片现象，染色结果完全达到甚至优于传统法，并大大缩短染色时间。

    3 讨论

    微波是一种高频电磁波，频率为30～30000MHz，波长在1～10000mm之间，微波可以提高分子的运动速度，增加细胞的渗透性和溶剂分子的穿透力，并且可以产生均匀的热效应，从而缩短染色时间，提高工作效率。微波可很好地保护组织结构和细胞形态，克服了常规染色法中温度高、时间长，组织易收缩、脱片等现象。我们在实际应用中，认为微波辐射比较适用于病理组织特染中，传统染色需时较长温度要求较高的各种染色，尤其是以硝酸银为主要试剂的染色。它可以节约大量时间，并且效果好，易掌握，对急性、疑难病例也有较大的定性价值。

    应用微波操作时，我们有以下几点体会:（1）微波照射达预定时间后，取出切片并在镜下观察，如浸染不够，可再次置于染液内，放入微波炉中继续浸染;（2）可根据试剂中浓度的不同选择档次和照射时间，如六胺银染色中硝酸银的浓度高，可选择5档3min，若浓度低则选择4档2min。（3）需要高温度染色时，如六胺银可以预先将染液预热。（4）微波炉可以产生较高的热效应，且与辐射时间成正比，因此，要尽量选用浸染技术，避免滴染时少量的试剂在较高的温度下沸腾，干涸;影响切片质量。

    作者单位:200240复旦大学附属上海市第五人民医院病理科