一、生物学特性
单纯疱疹病毒(Herpessimplexvirus,HSV)有HSV-1和HSV-2两个血清型,均呈球形、直径为120~150nm,由核心、衣壳、被膜及包膜组成。核心为160Kb、分子量约108的双股DNA,衣壳呈二十面体对称,外复一层厚薄不匀的被膜,最外层为典型的脂质双层包膜,上有突起。
HSV基因组可编码100多种多肽,已知至少有近十种系病毒的晚期蛋白,与病毒感染和破坏细胞密切相关,例如:gB、gC、gD、gE、gG、gH等糖蛋白可参与病毒对宿主细胞的吸附和穿入;gH能控制病毒从细胞核膜出芽释放;gB、gC、gD、gH则诱导细胞融合,并具有诱生中和抗体(gD最强)和细胞毒作用(HSV糖蛋白均可)。此外,gC是补体C3b受体、gE为Fcγ的受体。gG具有型特异性,是HSV-1和HSV-2血清型鉴定的依据。
HSV对动物和组织细胞的敏感性广泛,常用的实验动物有小鼠、豚鼠、家兔等,多种原代人胚细胞、二倍体细胞以及动物细胞有助于HSV的分离培养。HSV感染细胞后很快导致受染细胞的病变,表现为细胞肿大、变圆、折光性增强,可见有核内嗜酸性包含体。HSV的增殖周期短,约需8~16小时,其抵抗力较弱,易被脂溶剂灭活。
二、致病性与免疫性
HSV的感染十分普遍,呈全球性分布。人是HSV唯一的自然宿主,主要通过直接密切接触和性接触传播。病毒可经口腔、呼吸道、生殖道粘膜和破损皮肤等多种途径侵入机体,孕妇生殖道疱疹可在分娩时传染新生儿。血清学调查表明,HSV抗体水平直接与年龄和社会经济状况相关,在多数欠发达国家,30岁以上人群HSV-1抗体的阳性率为90%;美国中产阶层人群中约有50~60%可检出HSV-1抗体,而社会经济状况较差的群体则接近90%。初次感染虽多无临床症状,但常转变为潜伏感染。两种不同血清型HSV的感染部位及临床表现各不相同,HSV-1主要引起咽炎、唇疱疹、角膜结膜炎,而HSV-2则主要导致生殖器疱疹。
三、微生物学检查法
1、病毒分离培养:病毒分离培养是确诊HSV感染的“金”标准。水疱液、唾液、脑脊液、眼角膜刮取物、阴道棉试子等标本接种人胚肾、人羊膜或兔肾等易感细胞,也可接种于鸡胚绒毛尿囊膜和乳鼠或小白鼠脑内,均可获较高的分离率。HSV引起的CPE常在2~3天后出现,细胞可呈肿胀、变圆、折光性增强和形成融合细胞等病变特征。HSV-1和HSV-2的单克隆抗体、HSV型特异性核酸探针等,可通过免疫荧光或核酸杂交法等用于病毒鉴定和分型。
2、快速诊断:将宫颈粘膜、皮肤、口腔、角膜等组织细胞涂片后,用特异性抗体作间接免疫荧光或免疫组化染色法检测病毒抗原;Wright-Giemsa染色镜检,如发现核内包涵体及多核巨细胞,可考虑HSV感染;将疱疹疱液进行电镜负染可迅速确诊。
原位核酸杂交和PCR法可用于检测HSVDNA。PCR产物的特异性鉴定选用Southernblot法,脑脊液PCR扩增被认为是诊断疱疹性脑炎的最佳手段。此外,DNA酶切图谱也可作HSV鉴定和型别分析。
HSV抗体测定对临床诊断意义不大,仅用于流行病学调查,常用方法为ELISA。
四、防治原则
避免与患者接触或给易感人群注射特异性抗体,可减少HSV传播的危险。无症状带毒者的唾液、尿道或生殖道是HSV-2的重要载体,一旦出现损伤应避免性接触。无环鸟苷、valacyclover、famcicclover能够抑制HSV感染的复发,但常规抗病毒药物的作用是直接针对病毒DNA多聚酶的,故难以清除潜伏状态的病毒。由于新生儿感染的危险性高,要特别注意预防分娩过程中病毒的传播。在某些情况下(如羊膜未破时)可采取剖腹产,以减少新生儿与病损生殖器的接触。分娩后给新生儿注射特异性抗体或丙种球蛋白也可作为紧急预防措施。近年来应用的重组HSV-2疫苗,不能减少已感染有HSV-2患者的复发率,但尚不明确对原发感染是否有效,几种HSV疫苗的研究正处在不同的发展阶段。
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