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免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是用荧光素标记一抗或二抗,检测特异性抗原或抗体的方法。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素和藻红蛋白,这些物质在激发光作用下可直接发出荧光,前者发黄绿色荧光,后者发红色荧光。
免疫荧光技术可用于鉴定免疫细胞的CD分子及自身免疫病的抗核抗体等。
1、直接荧光法:将荧光素标记的已知抗体直接进行细胞或组织染色测定未知抗原,用荧光显微镜、激光扫描共聚焦显微镜或流式细胞仪进行观察及测定。
直接荧光法检测不同的抗原,需要不同的特异性荧光抗体。
2、间接荧光法:用一抗与样本中的抗原结合,再用荧光素标记的二抗染色。此方法既可检测抗原又可检测抗体。
若查抗原,一抗是已知的;若查抗体,抗原是已知的。该法的灵敏度比直接法高,一种荧光抗体可用于多种不同抗原的检测。





