一氧化氮对肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响

　　目的：以往的工作表明，平阳霉素(BLMA5)诱导大鼠肺纤维化的早期，肺内NO增多，内源性NO的增多具有促肺内胶原蛋白增多的作用。肺成纤维细胞是肺间质合成和分泌胶原蛋白的主要细胞。为探讨NO促进胶原蛋白增多的机制，本实验观察NO供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)\,NO前体L-精氨酸(L-arginine, L-Arg)和NOS的阻断剂L-硝基精氨酸(NW-nitro-L-arginine, L-NNA)对肺成纤维细胞(Fb)增殖、凋亡和细胞数量的影响。方法：实验用SD乳鼠肺培养Fb。实验分为SNP组(Fb,SNP 5×10-4 mol/L, 24 h)、L-Arg组(Fb,L-Arg 2×10-3 mol/L, 24 h)、L-NNA组(Fb, 1.5×10-3 mol/L, 24 h)和对照组(control)。流式细胞仪测定细胞增殖和凋亡。每项指标测定4例，每例测定1×104个细胞。结果发现，SNP组肺成纤维细胞增殖指数(30.20±1.50， ×102 cells, n=4, ±s下同)和凋亡细胞数(8.60±1.10，×102 cells, n＝4)均较对照组细胞(20.30±2.30，×102 cells；3.60±1.30，×102 cells)明显增多(均P＜0.01)；肺成纤维细胞数(6.70±0.20，×103 cells, n＝6)也较对照组(5.10±0.30，×103 cells, n＝6)增多(P＜0.05)。L-Arg组细胞增殖指数、凋亡细胞数和肺成纤维细胞数与对照组比均无显著差异(P＞0.05)。与对照组比，L-NNA组肺成纤维细胞增殖指数(14.20±4.20，×102 cells, n＝4)降低(P＜0.05)，凋亡细胞数(12.30±2.10，×102 cells, n＝4)明显增多(P＜0.01)，肺成纤维细胞数减少(4.30±0.40，×103 cells, n＝6)(P＜0.05)。结论：NO对肺成纤维细胞具有双重作用，既促细胞增殖又促细胞凋亡，但以促增殖为主，最终使细胞数量增多；完全抑制成纤维细胞内源性NO释放，则通过抑制肺成纤维细胞增殖和促进其凋亡，使细胞数量减少，这提示NO能通过影响肺成纤维细胞增殖和凋亡而改变肺成纤维细胞数量。